搜索结果: 1-6 共查到“预防医学与卫生学 cDNA”相关记录6条 . 查询时间(0.056 秒)
构建正常人支气管上皮细胞(16HBE)与氯化镉诱导转化16HBE细胞间差异表达基因的消减cDNA文库。方法 以16HBE为驱动子,氯化镉诱导转化16HBE细胞为检测子,应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建cDNA文库,经2次消减杂交和2次PCR后,将巢式PCR产物插入载体,随机挑选克隆进行鉴定。结果 得到纯度高及完整性好的总RNA和mRNA,并扩增出良好的双链cDNA,cDNA与接头的连接效率＞2...
人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒NS4B结合蛋白基因的筛选
肝炎病毒属 基因文库 胰腺 载体蛋白质类
2012/5/29
从人胰腺细胞cDNA文库中，采用酵母双杂交方法筛选HCV NS4B包膜蛋白的相互作用蛋白。方法 人胰腺细胞cDNA文库先进行扩增，随后纯化及鉴定，然后将鉴定好的人胰腺细胞cDNA文库质粒转化入酵母菌株Y187。构建pGBKT7-NS4B作为诱饵质粒，随之转化酵母菌株AH109，用色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)筛选阳性菌落。配合两种重组酵母菌株AH109与Y187，用四缺培养基及X-α-gal...
目的: 用酵母双杂交技术筛选肝细胞中与乙型肝炎病毒(HBV)前-X蛋白结合蛋白的编码基因.方法: 用多聚酶链反应(PCR)法扩增HBV基因组中的前-X基因，连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒，转化酵母细胞AH109并在其内表达，然后与转化了人肝细胞文库质粒的酵母细胞Y187进行配合，在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落，增菌后提出质粒，转化入大肠杆菌(DH5 alpha)，提出质粒...
尖吻蝮毒腺cDNA文库的构建、金属蛋白酶基因克隆和序列分析
基因文库 蝮蛇类 金属内肽酶类 序列分析
2008/12/18
目的 构建非标准化尖吻蝮（五步蛇，Agkistrodon acutus）毒腺cDNA文库，随机挑取克隆测序，分析金属蛋白酶基因。方法 以Trizol试剂提取新鲜尖吻蝮毒腺总RNA, 以superscriptⅡ反转录酶合成cDNA第一链并以DNA聚合酶Ⅰ连续合成第二链。双链DNA经过含EcoRⅠ酶切位点接头加接，末端磷酸化并以 XhoⅠ内切酶酶切，按照< 0.25 kb, 0.25～0.5 kb, ...
目的 构建携带人PAPS合成酶1（hpapss1 )全长cDNA的重组腺病毒，并感染巨噬细胞使PAPSS1过表达，为研究其在胆固醇代谢中的作用提供工具。方法 PCR扩增hpapss1全长cDNA，继而构建了真核表达载体pCDNA3.0-hpapss1，再将hpapss1片段亚克隆入腺病毒穿梭质粒pshuttle-CMV，得到转移质粒pshuttle-CMV-hpapss1，并将其转化含腺病毒基因组...
登革病毒cDNA的生物信息学分析及其Oligo探针设计
2007/7/25
生物芯片是近年来在生命科学领域中崭露头角的一项新技术，凭其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点，在序列分析、基因表达、基因组研究及基因诊断等领域已显示出很好的应用前景[1][2][3][4]。生物芯片的特点决定它必须依赖于生物信息学的手段和方法来进行芯片设计中探针的筛选、芯片分析结果的研究等[5][6]。本研究根据GenBank数据库中的生物信息，利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)中...