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低密度cDNA Macroarray对干扰素α抗病毒蛋白的筛选
肝炎病毒 乙型 干扰素 抗病毒蛋白 cDNA Macroarray
2012/2/24
基于低密度cDNA Macroarray技术筛选出差异表达的干扰素（IFN)α抗病毒基因，以探讨IFNα抗病毒蛋白的表达与HBV复制的关系。 方法 以一定浓度的IFNα处理肝胚瘤细胞株HepG2和HepG2.2.15细胞6 h，用cDNA Macroarray分析比较两细胞株IFNα抗病毒基因表达谱，并筛选出差异表达的IFNα抗病毒基因。将表达HBV核心蛋白（HBc）的质粒pHBc-EGFP转染...
调节破骨细胞分化的ＲＡＮＫ特异性ｃＤＮＡ片段的研究
RANK特异性cDNA片段 嵌合体 破骨细胞 分化
2011/12/24
【目的】 在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段，为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】 先将RANK膜内部分的1.2 kb大小的cDNA分成20个片段，用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体，每一个突变体在RANK膜内部分含60 bp缺失。再将RANK...
人TSHR膜外区cDNA克隆及真核表达载体的构建
人TSHR膜外区 RTPCR 真核表达载体
2011/11/29
目的 通过生物技术获得促甲状腺激素受体膜外区表达载体，为TSHR膜外区的研究提供有力工具。方法 从人甲状腺组织中提取总RNA，RTPCR分离得到TSHR膜外区cDNA，双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结果 经酶切鉴定、测序分析表明TSHR膜外区片段与GenBank提供的完全相同。结论 成功构建了人TSHR膜外区真核表达载体。
应用抑制消减杂交技术构建哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因消减cDNA文库
2007/7/25
支气管哮喘是呼吸系统的常见病多发病，随工业化程度的不断加深，其发病率有上升的趋势,对人类的生存和健康构成了极大的威胁。支气管哮喘是以气道可逆性阻塞和气道高反应为特征的气道炎性疾病。近年来的研究表明其病因复杂，是一组多因子、多基因的疾病。就靶细胞而言，目前普遍认为嗜酸细胞是引起迟发相哮喘反应和气道高反应性的关键细胞。本研究用抑制消减杂交技术 (supression subtractive hybri...
应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA
2007/7/25
近20年来，相当多的研究已经表明，支气管哮喘是一种复杂的多基因遗传病。而嗜酸性粒细胞(EOS)在气道组织的浸润是引起气道炎症的主要原因及特征之一，是哮喘发作的关键效应细胞[1][2]。人们迫切想知道哮喘发病过程中具体的效应细胞即EOS基因改变的本质，这也是近年来研究的主导方向。然而基因表达的研究需要RNA的分析，用传统的方法从非常小的样本中获得RNA及高质量的cDNA非常困难，效率也低下，这就限制...
人骨形态发生蛋白12前体蛋白cDNA的克隆及序列分析
形态发生
2007/7/25
骨形态发生蛋白12(BMP12)属于目前发现的17个BMP家族成员之一，不同于其它BMP家族成员的是，它不能诱导MSCs向骨和软骨的分化，但能诱导其分化成腱/韧带，是腱形态发生中重要的调节分子[1]。本实验利用RT-PCR方法从人胎盘组织扩增出长926 bp的编码人BMP12带有分泌信号的前体蛋白cDNA，并构建出真核表达载体pTARGETTM- hBMP12，以进一步深入探讨BMP12在腱发育中...
利用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)和cDNA Microarray筛选肺癌组织、肺癌旁组织和其它肿瘤组织中相互差异表达的基因.方法 将利用SSH构建的BEP2D细胞永生化阶段、恶性转化前阶段和恶性转化阶段三个cDNA文库中的克隆制作在一张芯片上,筛选了15例肺癌组织、5例肺癌旁组织和其他癌组织24例(肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、...