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为加强教师之间的学术交流与合作,活跃川北医学院基础医学与法医学院学术氛围,提升教师科研能力,2021年9月22日下午,基础医学创新平台胡清勇博士为部分老师及研究生作了专题学术讲座。讲座由基础医学院副院长杨健主持。
应用德尔菲法筛选、优化藏医体质判定的条目,为构建藏医体质量表提供依据。方法在文献研究、专家访谈的基础上建立藏医体质类型判定的条目池,设计两轮问卷咨询39名来自北京、西藏及其他四省藏医专家,对调查结果进行统计分析。
寻找与Bat3结合的蛋白质。方法 采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果 筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可与Bat3相互结合。结论 成功建立了串联亲和纯化技术平台,分离出可与Bat3相互作用的蛋白质Ubl4A。
随着药物筛选技术的不断发展,新的筛选途径和技术不断涌现,使得药物筛选朝着快速、高效、高通量等方面不断发展。微流控分析技术具有的分析微型化、高通量化、可集成化和良好的生物相容性等特点,为天然产物活性成分的筛选提供了新的方法和技术平台,该文介绍了用于天然产物活性成分的多种筛选方法,重点综述了与细胞培养相结合的微流控芯片筛选技术及其特点,微流控芯片筛选技术平台的构成,以及其在天然产物活性成分筛选中的应用...
从茅苍术Atractylodes lancea根中分离内生真菌,筛选能选择性降解转化茅苍术挥发油的菌株,实现内生真菌对茅苍术挥发油主要成分的转化作用。 方法: 利用微生物体外转化方法,通过气相色谱追踪挥发油变化,筛选出能选择性利用挥发油的内生真菌。通过单因素试验研究碳源、转速、装液量、初始pH和植物组织添加对内生真菌降解的影响,并选取对降解影响较大的因素进行正交试验。 结果: 筛选到的内生真菌AL...
以蠕形螨的DNA为模板,对蠕形螨简单重复序列锚定PCR(ISSR-PCR)反应体系优化并对ISSR引物进行筛选,为ISSR分析奠定基础。方法 用自然沉降法收集山羊蠕形螨,用基因组DNA提取试剂盒提取山羊蠕形螨DNA,并以此为模板,以(CA)8RG(R为1分子的嘧啶)为引物,利用正交实验法,从Mg2+浓度、引物用量、dNTPs、DNA模板用量和TaqDNA聚合酶以及退火温度对蠕形螨ISSR-PC...
寻找具有抗肿瘤活性的天然苄基异喹啉类生物碱。 方法: 本实验建立以DNA为靶标,运用离心超滤和HPLC联用技术,从中药中筛选可能具有抗肿瘤活性的苄基异喹啉类生物碱活性成分的方法;并利用体外肿瘤细胞实验,对筛选出的化合物进行抗肿瘤活性验证和评价。 结果: 从博落回等3种中药中发现并鉴定了9种化合物与DNA有相互作用,有良好的细胞增殖抑制活性。 结论: 建立起来的方法能用于中药中具有抗肿瘤活性的天然苄...
应用荧光共振能量转移(FRET)法检测丙型肝炎病毒(HCV)丝氨酸蛋白水解酶(NS3~4A)活性,建立HCV蛋白酶抑制剂筛选模型。方法 将质粒pMAL~c2/NS3-4A转化到大肠杆菌K12TB1中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析柱纯化得到麦芽糖结合的NS3-4A融合蛋白,用FRET法测定蛋白水解酶活性,建立特异性蛋白酶抑制剂筛选模型,优化反应体系,评价模型的可靠性。...
目的: 建立肝癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型. 方法: 用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得新发肝癌、肝硬化患者和正常人血清的蛋白质指纹图谱, 用计算机软件进行比较分析, 建立肝癌的筛选模型. 结果: 肝癌患者与健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白(4477, 8943, 5181, 8617, 13761 Da)在肝癌患者血清中高表达,...
目的:通过筛选隐源性肝炎血清蛋白结合蛋白,为隐源性肝炎的发病机制研究探索新途径. 方法: 应用噬菌体表面展示技术, 将隐源性肝炎患者血清作为固相筛选蛋白,用噬菌体正常人肝细胞T7 cDNA文库进行5轮生物筛选, 经噬斑PCR, 对筛选克隆进行DNA序列分析, 将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索,自GenBank中获得结合蛋白的cDNA和基因组的全长序列, 然后再探讨该蛋白在隐源性肝炎发病机制中...
目的:初步分析应激与适应对蛋白质合成的影响,筛选应激适应相关蛋白。方法:通过双向电泳分离总蛋白、PDQUEST软件分析、肽质量指纹图谱分析候选蛋白肽段组成,分析应激与适应对细胞蛋白质合成的影响。初步鉴定应激适应蛋白质点的类别。结果:预适应后再次热应激组表达增加的蛋白质点在各分子量范围均有分布,而直接热应激组表达增加的蛋白质点大多局限于低分子量范围。肽质量指纹图谱分析候选蛋白序列,初步鉴定了Tubu...
目的: 应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建As2O3处理的人肝癌细胞系HepG2差异表达基因的cDNA消减文库,筛选并克隆As2O3调节相关基因,阐明As2O3对肝细胞调节作用的分子生物学机制. 方法: 以As2O3处理HepG2细胞,同时以PBS处理的相同细胞系作为对照;24 h后制备细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为...
目的: 筛选HCV非结构蛋白2(NS2)反式调节蛋白(NS2TP)的结合蛋白,探讨HCV的致病机制及新蛋白NS2TP的生物学功能. 方法: 应用酵母双杂交系统3,将PCR法扩增的NS2TP基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化单倍体酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞文库质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-alpha-半乳糖(X-...
目的: 对丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCV NS4A)反式激活新基因NS4ATP2转染肝癌细胞的基因表达谱进行分析,探索该基因表达对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能. 方法: 应用基因表达谱芯片技术对重组表达质粒pcDNA3.1(-)-NS4ATP2和pcDNA3.1(-)空载体分别转染的HepG2细胞的mRNA的差异性表达进行检测. 结果: 基因表达谱芯片所检测的1152条目的基因均为G...
目的: 丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白是一个新的HCV基因产物,其生物学特性目前尚不明确,我们应用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选F蛋白结合蛋白基因.方法: 构建F蛋白诱饵质粒,转化酵母AH109后与含肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,在涂有X-gamma-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长. 挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒D...

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