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探讨荧光定量PCR检测痰曲霉菌在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者侵袭性肺曲霉菌病(invasive pulmonary aspergillosis, IPA)中的诊断价值。 方法:采用前瞻性观察性研究,入组2015年4月至2017年3月因COPD急性加重入住复旦大学附属中山医院的49例患者。收集患者常规痰液真菌培养后剩余的痰液,采用荧光定量PCR检测曲霉菌。同时分析患者的一般资料,包括临床症状、影...
2018年3月30日-4月1日,国际著名心脏瓣膜病会议2018 PCR Tokyo Valves在日本东京召开,华西医院心脏内科陈茂教授受邀作为会议联合执行主席出席会议并作学术报告。PCR Tokyo Valves隶属国际知名心脏介入系列会议PCR品牌旗下,与PCR London Valves以及由我院心脏内科主办的PCR-CIT China Chengdu Valves 同属PCR旗下重要国际心...
探讨应用多重巢式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)初筛急性髓系白血病(AML)融合基因的临床价值。方法 根据WHO2008 AML分型指南建立检测16种融合基因(AML1-EVI1、AML1-ETO、AML1-MDS1、AML1-MTG16、MLL-AF9、MLL-AF6、MLL-AF10、MLL-ENL、MLL-MLL、PML-RARα、PLZF-RARα、NPM1-RARα、CBFB-MY...
了解中国部分地区艰难梭菌聚合酶链反应(PCR)核糖体型别分布及其A、B毒素基因多态性,为建立适宜中国的艰难梭菌分子检测和分子分型技术提供基础数据,同时在基因水平上为艰难梭菌感染导致的复杂临床表现提供依据。方法对中国3个城市(北京、广州、济南)分离的64株艰难梭菌临床株进行PCR核糖体分型,并对不同型别的26株代表菌株的A、B毒素基因进行扩增测序。结果64株艰难梭菌中,毒素基因型以A+B+型(4...
建立一种LAN探针实时荧光定量PCR检测血清/血浆中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的方法。方法 建立LAN探针实时荧光定量PCR准确定量检测HBV DNA的方法,以TaqMan探针法为对照,进行LNA针实时PCR的方法学评价。用LNA探针法和TaqMan探针法两种方法检测39例慢性乙型肝炎患者血清样品,对检测结果进行比较。结果 相对于普通的TaqMan探针法,LAN探针实时荧光定量PCR检测HBV ...
检测不同Kellgren和Lawrence X线分级骨性关节炎病人膝关节液中微小RNA-140 (microRNA-140,miR-140)的表达水平,为进一步研究miR-140在骨性关节炎发生、发展中的作用提供理论依据.方法:收集骨性关节炎病人膝关节液40例 [关节炎组,又依据Kellgren和Lawrence X线诊断标准分为Ⅰ级亚组(10例)、Ⅱ级亚组(10例)、Ⅲ级亚组(10例)、Ⅳ级亚组...
目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7 保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果。结果成功建立了LAMP和PCR检测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfu/ml...
基于免疫磁珠分离及多重PCR技术建立出血性大肠埃希菌、福氏志贺菌、空肠弯曲菌、副溶血弧菌的快速检测体系。 方法 根据出血性大肠埃希菌uidA、福氏志贺菌ipaH、空肠弯曲菌hipo及副溶血弧菌tlh的基因序列设计特异性引物,优化免疫磁珠分离过程及多重PCR扩增中的各个环节,建立上述4种病原菌同步快速扩增体系,并鉴定该体系特异性、敏感性。 结果 发现M...
通过实时荧光定量PCR法检测内皮衍生基因-1(EG-1)的基因在甲状腺癌组织中的表达,探讨EG-1与甲状腺癌发生、发展的关系。 方法:选取38例甲状腺乳头状癌患者(病例组)和15例良性甲状腺疾病患者的甲状腺组织(对照组),采用实时荧光定量PCR法检测甲状腺组织中EG-1基因的表达,同时应用免疫组化学法检测EG-1的表达水平。结果:免疫组织化学结果显示, EG-1主要定位于癌细胞的细胞质,甲状腺乳头...
目的 检测转录因子CPH1和EFG1基因在游离态及生物膜态呼吸道白念珠菌临床分离株的表达差异,探讨其在生物膜形成过程中的作用。方法 选取10 株白念珠菌临床分离株,分别提取游离态及生物膜态白念珠菌总RNA,用荧光定量PCR的方法测定两种状态下CPH1和EFG1基因的表达,用△△Ct的方法计算其相对表达量。结果 白念珠菌生物膜态转录因子EFG1的表达是游离态表达水平的1.42~7.14倍,差异有显著...
淋巴增殖性疾病是一组病理形态、免疫表型、临床特征高度异质性的疾病。本文旨在评价流式细胞免疫分型联合聚合酶链反应(PCR)检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断中的应用价值。方法:分离79例拟诊淋巴增殖性疾病患者的新鲜病理标本(淋巴结、脾脏、胃活检组织和肝穿组织),流式细胞术分析细胞的免疫表型特征;同时采用BIOMED-2多重PCR分析组织的抗原受体基因重排状况及其克隆来源;并与病理诊断及免疫组织...
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis facterrelated apoptosisinducing ligand,TRAIL)是TNF超家族中的成员,属Ⅱ型跨膜蛋白,因其具有大量、快速地诱导转化细胞、肿瘤细胞及病毒感染细胞发生凋亡,而对大多数组织细胞没有毒性的特性[1],使其在肿瘤的治疗中具有较重要的研究价值。Survivin是凋亡蛋白抑制因子家族(inhibitor...
研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞中黑色素瘤抗原C1/癌睾丸抗原7(MAGEC1/CT7)基因的表达水平并初步探讨其临床意义。方法 制备含MAGEC1/CT7基因克隆片段的质粒标准品,采用实时定量PCR技术制作定量评估MAGEC1/CT7拷贝数的标准曲线,并利用该技术检测MM患者骨髓细胞中MAGEC1/CT7基因的表达水平。来自同种基因移植供者的正常人骨髓细胞作为对照。结果 检测...
利用实时荧光定量RT-PCR方法,检测白血病细胞人类端粒酶反转录酶(hTERT)的表达水平并探讨其临床意义。方法 采用基于TaqMan荧光技术的实时定量RT-PCR方法检测白血病患者骨髓单个核细胞及10种白血病细胞系hTERT mRNA拷贝数,来自同种基因移植供者的正常人骨髓细胞作为对照。结果 与28例正常人组相比,33例AML1/ETO融合基因阳性的急性髓性白血病(AML)患者骨髓细胞hTERT...
分析慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia, CML)患者外周血中高迁移率蛋白A2基因(high mobility group A2,HMGA2)mRNA的表达及其相关临床特征,探讨它们在CML演进中的作用及临床意义。方法:采集2006年1月至2008年2月在南方医科大学南方医院血液科就诊的24例CML和5例健康对照的骨髓和外周血标本(所有参与试验及贡献骨髓和外周血标本的...

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