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恒磁场对Feridex-GFP 双标记BMSC 在损伤肝脏中定植的影响
移植 Feridex-GFP双标记 恒磁场 定植
2014/11/3
评价体外恒磁场作用下，双标记干细胞经外周静脉、门静脉、肝动脉移植在损伤肝脏中的定植率及治疗急性肝损伤的有效性。方法：分离骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)，经培养传代纯化、体外诱导，分化为肝样细胞，绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)和菲立磁(Feridex)体外双标记BMSCs，不同途径移植双...
GFP-LC3真核表达载体构建、定位及胶质瘤U87稳定转染细胞系筛选
绿色荧光蛋白质类 自噬 神经胶质瘤 LC3
2014/2/24
构建GFP-LC3真核表达载体，验证其在胶质瘤U87细胞系中对细胞自噬现象的指示作用，并获得稳定转染该载体的U87细胞。方法 以人外周血cDNA为模板扩增全长LC3基因，通过分子生物学操作将其导入pcDNA3-GFP中，得到重组质粒pcDNA3-GFP-LC3。将重组及对照质粒转染胶质瘤U87细胞系，雷帕霉素(Rapamycin)处理48 h后用Western blot方法检测细胞中自噬相关蛋白表...
SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA, 简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp), 含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal)。在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14), 构建pAlu14质粒, 瞬时转染HeLa细胞, 用Northern blot检测...
研究靶向hTERT基因的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA对人结直肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的治疗作用。 方法： 于裸鼠右侧腋下皮下注射人结直肠癌SW480细胞建立结直肠癌移植瘤动物模型，随机分为生理盐水组（NS组）、pGPU6/GFP/Neo-NC-shRNA组（NC-shRNA组）和pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA组（hTERT-shRNA组），各组...
重组GFP-VEGF6a融合肽的构建表达及其抗肿瘤活性
GFP-VEGF6a融合肽 H22细胞 肝癌 抑制血管生成
2012/3/31
为了探讨血管内皮生长因子6a（VEGF6a）的抗肿瘤及其抑制外周血管生成活性，采用两次加端PCR技术，将VEGF6a片段的基因和绿色荧光蛋白（GFP）基因通过GGGS柔性片段融合，连接至pET28a载体，构建GFP-VEGF6a(GFP6a)融合肽E.coli表达菌。GFP6a融合肽通过乳糖诱导表达和肝素亲和树脂精制得到。建立皮内和皮下移植型肝癌ICR小鼠模型，验证了VEGF6a抑制肿瘤外周血管及...
以慢病毒构建的GFP阳性卵巢肿瘤细胞中侧群细胞的分离和动物活体内示踪
侧群细胞 肿瘤干细胞 示踪
2010/12/28
目的 通过慢病毒将绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP)基因转入卵巢癌细胞中，研究慢病毒感染对细胞泵出Hoechst 33342能力的影响，追踪GFP(+)侧群（side population，SP）细胞在裸鼠体内的荧光表达和肿瘤成像。方法 选用人卵巢癌细胞株HO-8910PM，以慢病毒感染GFP基因至人卵巢癌细胞株HO-8910PM，摸索以Ubiquiti...
利用红花瞬时表达aFGF-GFP融合基因的研究
aFGF-GFP 表达载体 红花 瞬时表达
2012/7/19
利用红花表达aFGF可以使aFGF的组织创伤修复的活性和红花的活血通经、散瘀止痛以及跌打损伤等功效累加,直接用于外伤修复。 方法 :利用分子生物学方法构建aFGF与GFP的融合基因载体,通过农杆菌介导法将其转化到红花中,形成抗性红花愈伤组织后,利用荧光显微镜进行检测。 结果 :通过PCR分别扩增了aFGF和GFP基因片段,确定出PCR反应体系和最佳反应条件,合成了融合基因片段aFGF-GFP,成功...
研究叶酸受体介导下的壳聚糖-pGPU6/GFP/Neo纳米粒在叶酸受体表达程度不同的肿瘤细胞中的靶向转染特点。方法：制备叶酸偶联壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒（folate-chitosan-pGPU6/GFP/Neo,FA-CS-DNAnano）和壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒（chitosan-pGPU6/GFP/Neo,CS-DNAnano），红外光谱扫描鉴定其合成，透射电镜...
不同转染方式对GFP表达质粒在小鼠肝脏的表达影响
GFP表达质粒 流体力学注射 门静脉 基因疗法
2012/6/29
研究经流体力学注射、门静脉和腹腔常规注射3种不同途径注射GFP表达质粒后，目的基因在小鼠肝脏的表达情况及其转基因效率。方法 将裸质粒或脂质体包裹的质粒DNA分别应用流体力学注射、门静脉及腹腔常规注射法注入同种异体小鼠体内,48?h后分别取血和肝组织, 通过荧光显微镜观察3种转染途径对质粒DNA在小鼠肝脏的表达影响。结果 流体力学注射组及门静脉常规注射组均可见大量绿色荧光蛋白表达，两组的荧光表达...
有效EDRF启动子驱动GFP基因表达的研究
红系分化相关因子 启动子 基因表达 绿色荧光蛋白
2012/7/2
通过克隆不同长度红系分化相关因子（EDRF）基因启动子，驱动GFP基因的表达，探讨EDRF启动子的特点。方法 用PCR扩增5种不同长度的EDRF启动子（长度分别为697、496、484、372、283bp），并将启动子分别克隆至pcDNA-GFP载体上，构建驱动GFP表达载体后，转染NIH3T3和MEL细胞，采用荧光显微镜、流式细胞术比较不同长度启动子的活性。结果 经荧光检测，在NIH3T3和...
Expression of Green Fluorescent Protein (GFP) using In Vitro translation cell free system
Green Fluorescent Protein (GFP) pIVEX In Vitro cell free expression system
2009/12/17
Background and the purpose of the study: One of the major concerns about recombinant protein production is its possible toxicity for the organism. Purification of the recombinant protein is another ch...
Staurosporine诱导人乳腺癌MCF7/GFP-Bax非受体依赖途径的细胞凋亡对Bax自胞浆至线粒体转移定位的影响
staurosporine 细胞凋亡 GFP-Bax 线粒体
2009/11/25
以建立的人乳腺癌MCF7 细胞GFP-Bax稳定表达细胞株(MCF7/GFP-PBax)，观察staurosporine(STS)诱导的非受体途径的细胞凋亡对Bax自胞浆转移定位于线粒体的影响。荧光显微镜观察凋亡细胞Bax从细胞浆至线粒体转移和细胞核染色体断裂，检测STS诱导细胞凋亡的量效和时效关系。免疫荧光法观察GFP-Bax从细胞浆转移至线粒体与定位、细胞色素c(cytochrome c，Cy...
hBDNF-GFP基因转染神经干细胞后hBDNF的表达及生物学特性研究。
目的：构建由绿色荧光蛋白（GFP）标记的人醛糖还原酶（AR）融合基因真核表达载体并在HEK293细胞中表达。 方法:应用DNA重组技术构建AR与GFP的融合基因（AR-GFP），将AR-GFP插入pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体中，通过磷酸钙共沉淀转染HEK293细胞，倒置荧光显微镜评价转染效率，Western blotting 技术检测AR基因在转染细胞中的整合及表达，分光光度法...